Ізоляція коронавірусу врх в культурах клітин

А. Березенко, В. Недосєков, О. Годовський
Анотація

Одним із найбільш поширених у світі вірусів, що спричиняє захворювання у великої рогатої худоби є коронавірус ВРХ (BCoV). Цей вірус є збудником інфекції респіраторного та шлунково-кишкового тракту в новонароджених телят, що призводить до значних економічних втрат, як у молочному, так і в м’ясному напрямах тваринництва. З огляду на складну епізоотичну ситуацію щодо коронавірусів у світі та часткову антигенну спорідненість ВCoV з коронавірусами інших видів тварин та людини, вкрай важливим і актуальним стає виділення нових штамів коронавірусів, їх ідентифікація та оптимізація умов культивування. Метою наших досліджень було визначити особливості методів виділення коронавірусу ВРХ та підібрати способи його культивування в культурі клітин із метою отримання вірусу з найбільшими титрами інфекційної активності. Експериментально доведена чутливість культуральних систем до вірусу і встановлено, що використання перещеплюваної лінії культури клітин нирки теляти (МДБК) та первинно-трипсинізованої культури клітин нирки ембріона теляти (НЕТ) дозволяють отримати вірусовмісну суспензію з титром інфекційної активності 5,54±0,16 lg ТЦД50/1,0 мл та 5,59±0,14 lg ТЦД50/1,0 мл відповідно, що є перспективним для біотехнологічних розробок. Подальші дослідження планується спрямувати на дослідження отриманого вірусного ізоляту для послідуючої розробки засобів діагностики та імунопрофілактики коронавірусної інфекції у ветеринарній медицині

Ключові слова

Coronaviridae, біологічні властивості, коронавірус великої рогатої худоби, культивування вірусів, культура клітин, інфекційна активність

ЦИТУВАТИ
Berezenko, А., Nedosekov, V., & Godovskiy, О. (2021). Isolation of bovine coronavirus (BCOV) in cell cultures. Scientific Reports of the National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine, 17(4),5-16. https://doi.org/dopovidi2021.04.001
Використані джерела
  1. Nedosiekov, V.V., Blakha, T., Sytiuk, M.P., Martyniuk, O.H., Melnyk, V.V., & Yustyniuk, V.Ye. (2021). Fundamentals of biosafety and animal welfare. Nizhyn.
  2. Nedosiekov, V., Khaunkhorst, E., Sytnik, V., Shevchuk, V., & Zhukovskyi, M. (2019). Organization and economics of veterinary affairs: Textbook. Kyiv: NUBiP of Ukraine.
  3. Bok, M., Alassia, M., Frank, F., Vega, C.G., Wigdorovitz, A., & Parreno, V. (2018). Passive immunity to control bovine coronavirus diarrhea in a dairy herd in Argentina. Revista Argentina de Microbiología, 50, 23-30. https://doi.org/10.1016/j.ram.2017.03.007.
  4. Clark, M.A. (1993). Bovine coronavirus. British Veterinary Journal, 149, 51-70. https://doi.org/10.1016/S0007-1935(05)80210-6.
  5. Dea, S., Roy, R.S., & Begin, M.E. (1980). Bovine coronavirus isolation and cultivation in continuous cell lines. American Journal of Veterinary Research, 41(1), 30-38.
  6. Decaro, N., & Lorusso, A. (2020). Novel human coronavirus (SARS-CoV-2): A lesson from animal coronaviruses. Veterinary Microbiology, 244, 108693. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2020.108693.
  7. Forni, D., Cagliani, R., Clerici, M., & Sironi, M. (2017). Molecular evolution of human coronavirus genomes. Trends in Microbiology, 25(1), 35-48.
  8. Inaba, Y., Sato, K., Kurogi, H., Takahashi, E., Ito, Y., Omori, T., et al. (1976). Replication of bovine coronavirus in cell line BEK-1 culture. Archives of Virology, 50(4), 339-342.
  9. Jerez, J.A., Gregori, F., Brandão, P.E., Rodriguez, C.A.R., Ito, F.H., Buzinaro, M.D.G., & Sakai, T. (2005). Isolation of bovine coronavirus (BCoV) in monolayers of HmLu-1 cells. Brazilian Journal of Microbiology, 36(3), 207-210. https://doi.org/10.1590/s1517-83822005000300001.
  10. Mebus, C.A., Stair, E.L., Rhodes, M.B., & Twiehaus, M.J. (1973). Neonatal calf diarrhea: Propagation, attenuation and characteristics of a coronavirus-like agent.
  11. Saif, L.J., Wang, Q., Vlasova, A.N., Jung, K., & Xiao, S. (2019). Coronaviruses. Diseases of Swine, 488-523.
  12. Sato, K., Inaba, Y., Kurogi, H., Takahashi, E., Ito, Y., Goto, Y., et al. (1977). Physico-chemical properties of calf-diarrhea coronavirus. Veterinary Microbiology, 2(1), 73-81.
  13. Takahashi, E., Inaba, Y., Sato, K., Ito, Y., Kurogi, H., Akashi, H., et al. (1980). Epizootic diarrhoea of adult cattle associated with a coronavirus-like agent. Veterinary Microbiology, 5(2), 151-154.
  14. NCBI Taxonomy Browser. (n.d.). Retrieved from https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?mode=Info&id=11128&lvl=3&lin=f&keep=1&srchmode=1&unlock.